Immuunikolloidisen kullan valmistuksen jälkeen se on laimennettava tiettyyn pitoisuuteen ja adsorboitava erityiseen inerttiin väliaineeseen tuotteen valmistamiseksi. Yleensä erikoismateriaaleja käytetään yleisesti lasikuituina tai kuitukankaina. Lasikuitu ja kuitukangas itsessään ovat yleensä hydrofobisia, ja kolloidinen kultateollisuus käyttää yleensä pinta-aktiivisella aineella esikäsiteltyä lasikuitua tai kuitukangasta, yleensä kaava on 1 % Tween20 kohtalainen PVA. Mediakäsittelyn jälkeen immuunikolloidisen kultalaimennuksen yhteensopivuus on kriittisin. Tämänhetkiset yhteenvetoperiaatteet on tiivistetty seuraavasti:

1. Sopivat ionilajit ja vahvuus

Loppujen lopuksi immuuni e kolloidinen kulta sisältää bioaktiivista molekyylejä, ja se kohtaa myös monia erilaisia ​​näytteitä levitettäessä. Periaatteessa se on laimennettava puskuriin, jossa on sopiva pH. Empiirinen arvo on 6-9. Tämän alueen valinnaiset puskurit ovat pääasiassa Tris ja PB, eivätkä ne sulje pois muunlaisia ​​puskureita. Kun käytetty puskuri-ionivahvuus on liian suuri yli 0,2 M, se voi aiheuttaa huonon vapautumisen, huonon kromatografian tai epänormaaleja havaitsemistuloksia. Ionien vaihtelulla on myös monia rajoituksia immuunikolloidisen kullan erilaisista biomolekyyleistä johtuen, kuten kalmoduliini voi olla sukua Ca 2 -ioneille. Halogeeni-ionivoimakkuudella näyttää olevan erityinen tuhoisa vaikutus kolloidisen kullan stabiilisuuteen, kuten oppikirjan optimaaliset merkintäolosuhteet NaCl-virheenkorjausta varten.

2. Makromolekulaarinen materiaali toimii tasaisesti jakautuneena kuivuneen kolloidisen kullan runkoina

Tämä on itse asiassa kylmäkuivausprosessin teoreettinen perusta, joka soveltuu kolloidisen kullan kuivausprosessiin. Niiden, jotka ovat opiskelleet pakastekuivausta, pitäisi tuntea hyvin pieni tämä prosessi. Tyhjiö on termodynaaminen endoterminen prosessi. Asiantuntijat osoittavat, että kolloidisen kullan tyhjiökuivaus on jäädytys- ja sitten sublimaatioprosessi, joka on hyvin samanlainen kuin lyofilisointi. Nopean kuivumisprosessin ansiosta kuitukangasmateriaalit käyttävät suurimman osan kuivausprosessista, mutta makromolekyylien luurankovaikutus auttaa edelleen suuresti tuotteen vapautumisnopeuteen ja -suhteeseen. Yleisesti käytetyt makromolekyyliset aineet, kuten PEG4000, PEG20000, PVP jne., on suositeltavaa valita sellainen mahdollisimman pitkälle.

3. Pienimolekyylinen materiaali suojaa proteiiniaktiivisuutta vastaan

Glyseroli, sakkaroosi, trehaloosi ja erilaiset oligosakkaridit, joita yleisesti käytetään proteiinien varastoinnissa, auttavat tuotteiden säilyvyyden säilyttämisessä. Näiden aineiden lisäämisen huomiotta jättäminen voi rajoittaa laboratoriotuotteiden tuotantoa ja markkinoille saattamista. Näitä aineita käyttävät yleisesti myös jäädytetyt kantasolut.

4. Inertti proteiini

Tällaisten aineiden toiminnot ovat vielä monimutkaisempia. Ensinnäkin se suojaa kohdeproteiinin aktiivisuutta ja ylläpitää kolloidisen kullan kolloidista stabiilisuutta. Ne eliminoivat epäspesifisiä suljettuja aineita ja toimivat myös dispergoituneiden kolloidisten kultahiukkasten rungossa. Usein käytettyä BSA:ta, OVA:ta, kaseiinia ja muuta halpaa proteiinia ei näytä olevan helppo löytää, rasvaton maitojauhe henkilökohtaista neuvontaa, laatua on liian vaikea valvoa, tietysti jos olet käyttänyt ja vaikutus on hyvä, siellä ei tarvitse liikaa murehtia.

5. S pinta-aktiivinen aine

Tämä asia on ehdottoman välttämätön tällä alalla, mutta adsorptiomateriaali on esikäsitelty pinta-aktiivisuudella tai sitä ei voida lisätä immunokolloidikullan laimentimeen. Normaalioloissa Tween20 on ok, itse asiassa proteiinin säätelyyn yleisesti käytettyjä ionittomia pinta-aktiivisia aineita voi kokeilla, aika sitten korkea ihminen sanoi TritonX-100 saattaa häiritä N-päätä proteiinia ei käytetä, kuuntelin ei Ymmärrän hyvin, anna tässä neuvoja.

6. Muut

Tuotelajit vaihtelevat, edellä mainitut viisi materiaalityyppiä, selite ja jotkut voivat "parantaa tuotteen herkkyyttä", "parantaa tuotteen havaitsemisen lineaarista aluetta", "pakotettu muuntaminen * * havaitsemisen paras raja-alue", "HAMA-vaikutuksen esto" ja "linja". aikasyvyyden muutoksen loppu" kuten mystinen lisäys, ei teoriassa sulje pois mahdollisuutta, mutta usein "jumalan" tehoalue on hyvin kapea, eli "jumala" voi soveltaa yritykseen vain tuotteen vasta-ainetta , toinen ympäristö on virheellinen. Jumalaa etsivänä tehtävänä on usein suuren tutkimus- ja kehitystyyppisen yrityksen vanhempi tekninen henkilöstö, ja jumalien hallinta on usein kuin yrityksen salaisuutta.