1. Lisää näytteitä: Lisää näytelaimennos päällystetylle levylle, laimenna seerumi PBS:llä tai suolaliuoksella suhteessa 1:20 ja lisää sitten 10 ul mikrolevyn reaktiokuoppiin.
2. Kontrollilisäys: 3-kuoppainen negatiivinen kontrolli, 1-kuoppainen positiivinen kontrolli ja 100 ui kontrolliseerumia.
3. Inkubointi: Ravista reaktiolevyä, jotta näyte sekoittuu hyvin, ja aseta se sitten 37 °C:n inkubaattoriin tai vesihauteeseen 20 minuutiksi.
4. Lattian pesu: Laimenna 15 ml pesuliuosta 300 ml:ksi tislatulla vedellä. Käsin pestäessä reaktiolevyilman sisältö tulee kaataa ulos ja sijoittaa pesunesteellä täytettyyn reikään ja seisoa sitten 30 ravistamassa voimakkaasti. Toista tämä toimenpide 5 kertaa ja vatkaa kuivaksi. Koneen on suoritettava 5 kertaa. Kuhunkin kuoppaan voidaan ruiskuttaa tai täyttää 200 ul pesuliuosta, jonka jälkeen se jätetään 30 minuutiksi ja kuivataan.
5. Lisää entsyymileimattu työliuos: Lisää 100 ui entsyymileimattua työliuosta jokaiseen kuoppaan 37 °C:n inkubaattorissa ja pese levy viisi kertaa 20 minuutin kuluttua. Pesulevy on sama kuin vaiheessa 4.
6. Tämä on reaktion jälkimmäinen vaihe, jossa väri kehittyy ja reaktio päättyy: 50 ui substraattia lisätään reaktiokyvennykseen ja väriä kehitetään 10 minuuttia pimeässä 37 °C:ssa. Liuos kussakin kuopassa pysäytettiin ja sekoitetaan reaktion lopettamiseksi. Mikrolevyjä on käytettävä steriileissä olosuhteissa. Desinfioi ja puhdista levyt huolellisesti käytön jälkeen, mutta huomaa, että joidenkin levyjen on luettava ohjeet huolellisesti, jotta näet, voidaanko ne steriloida korkeissa lämpötiloissa.