Yleisesti ottaen veren monimutkaisen koostumuksen vuoksi monilla aineilla, erityisesti korkeampien eläinten plasmalla tai seerumilla, on voimakas häiriövaikutus TAL (LAL) -reagenssin ja endotoksiinin väliseen reaktioon. Siksi, kun testaamme tällaisten näytteiden endotoksiinia, meidän on poistettava häiritsevät aineet ennen testausta.
Tällä hetkellä plasman häiritseviä aineita ovat pääasiassa erilaiset proteaasi-inhibiittorit, endotoksiineja sitovat proteiinit ja plasminogeeni-inhibiittorit. Kolorimetriaa varten tekijä Xa voi hajottaa Boc-LEU-Gly-Arg-PNA-peptidiketjun. Siksi nämä häiritsevät aineet on eliminoitava ennen määritystä.
Esikäsittelymenetelmät häiritsevien aineiden poistamiseksi verestä ovat seuraavat:
(1) Laimennuslämmitysmenetelmä: plasma laimennetaan 3–10 kertaa liuenneella vedellä ja kuumennetaan sitten 37–100 ℃ vedessä. Pitoaika on yleensä 5-10 minuuttia;
(2) Kloroformiuuttomenetelmä: lisää sama määrä kloroformia plasmaan ja värähtele 3 tuntia ja ota sitten ylempi kerros havaitsemista varten;
(3) Eetterikäsittelymenetelmä: lisää eetteriä plasmaan käsittelyä varten ja poista eetteri 40 ℃:ssa;
(4) Trifluorietikkahappomenetelmä: lisää etikkahappoa plasmaan pH:n säätämiseksi 4,0:ksi ja käytä sitten K2HPO4:a pH:n säätämiseksi arvoon 7-7,5;
(5) Pinta-aktiivisen aineen käsittelymenetelmä: laimennuslämmitysmenetelmän tapaan vain laimennusvesi muutetaan pinta-aktiiviseksi aineeksi;
(6) Geeli suodatus;
(7) Alkalinen käsittelymenetelmä: plasmaa pidettiin 0,2 NNaOH:ssa 37 ℃ 10 minuuttia ja sitten neutraloitiin HCl:lla;
(8) Perkloorihappomenetelmä (PCA) tai uusi perkloorihappomenetelmä (uusi PCA);
(9) Beads-menetelmä: laita erikoishartsia absorboiva endotoksiini plasmaan, ota se pois ja lisää LAL-reagenssi reaktiota varten.
Näistä menetelmistä yleisesti käytetyt menetelmät ovat kloroformiuuttomenetelmä, laimennuskuumennusmenetelmä, perkloorihappomenetelmä (PCA) ja uusi perkloorihappomenetelmä (New PCA). Kahdesta ensimmäisestä menetelmästä on keskusteltava määrityksen aikana endotoksiinien talteenottonopeuden, väärien positiivisten tulosten ja muiden ongelmien vuoksi. PCA-menetelmää (New PCA-menetelmä) käytetään lisätyn endotoksiinin hyvän talteenottonopeuden vuoksi tällä hetkellä pääasiassa Japanissa prekliinisissä hoidoissa.